如何提高液相色譜柱柱效呢？

　　如何提高液相色譜柱柱效呢？
       以下介紹了幾種上流行的測量和計算柱效值的方法。
　　
　　1、提高液相色譜柱柱效的方法
　　
　　我們知道色譜峰的擴寬與移動相在熱力學的分配過程、移動相和固定相中傳質阻力
　　
　　所引起的不平衡有關,譜峰擴寬（非平衡）的程度是流速對傳質速率的直接函數。要提
　　
　　高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
　　
　　（1）降低移動相的流速,但會使分析時間延長。
　　
　　（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。
　　
　　（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。
　　
　　（4）選用低粘度的移動相,以利于快速傳質,但卻不利于多組份分析。
　　
　　（5）適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
　　
　　（6）盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。
　　
　　從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相和制約的。只有通過對
　　
　　柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到*的工作條件。
　　
　　2、對柱效值進行跟蹤測算應注意的問題
　　
　　我們也應記住柱效值即塔板數只表示該色譜柱裝填的好壞,只用柱效值并不足以預測
　　
　　在所有條件下的柱性能,因為在這些條件下,柱性能主要表示動力學過程對色譜柱譜
　　
　　帶加寬的量。其他一些影響峰寬的因素,如柱外效應和熱力學因素（通常表現為峰拖
　　
　　尾）,在理想情況下對于確定柱效值并不起重要作用。因為任何一個柱性能的定義都
　　
　　必然與用此色譜柱所做的分離相,所以依據一個單獨的數字來評定柱性能是不切
　　
　　實際的。對大多數色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅
　　
　　僅有高柱效并不能保證這種分離能力。
　　
　　不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數影響柱效的測定。這些參數包括:洗脫
　　
　　液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數所用的溶質,溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒
　　
　　度,還有所選用的測量和計算方法。盡管大多數柱效測算沒有設法消除液相色譜儀器
　　
　　系統各部件對表觀峰寬的影響,但只要儀器是正常使用的,這些影響是次要的。而測
　　
　　量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。
　　
　　3、幾種測量和計算柱效值的方法
　　
　　因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態分布而得到的樣品譜帶分布,
　　
　　故常常把色譜峰型看作正態曲線來計算理論塔板數。因此計算柱效（以理論塔板數n
　　
　　為單位）的公式習慣上定義為:
　　
　　式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從
　　
　　測峰寬的基線量起）有關的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側拐點處
　　
　　做切線與峰底基線相交兩點間的距離。　　
　　4、結論
　　
　　假如一個色譜峰真是正態峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結果。然而即使一
　　
　　些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質,由于柱內的槽或空隙,也會出現非
　　
　　正態峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態模型的峰型
　　
　　表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的高處測量,計算的理論塔板數
　　
　　值就越大（準確性越低）。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）
　　
　　的柱效值,同時為了保證定量的重復性,也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰
　　
　　非對稱性zui敏感的計算方法。如果目的
　　
　　僅僅是要監測色譜柱從*次使用到使用壽命結束這一過程中的柱效,那么以上任何
　　
　　一種方法都可以,應選擇zui簡便的方法。